| 產(chǎn)品編號 | D-9111 |
| 英文名稱 | DiR iodide |
| 中文名稱 | DiR 碘化物(細胞膜紅色熒光探針) |
| 別 名 | 1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'-Tetramethylindotricarbocyanine Iodide; DiR; DiIC18(7); |
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Specific References (6) | D-9111 has been referenced in 6 publications.
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| 克 隆 號 | |
| CAS | N/A |
| 理論分子量 | kDa |
| 檢測分子量 | |
| 保存條件 | Store at -20℃, protect from light. |
| 產(chǎn)品介紹 |
DiR is a lipophilic carbocyanine near infrared fluorescent dye. DiD，DiO，DiI，DiR和DiS染料是一族親脂性的熒光染料，可以用來染細胞膜和其它脂溶性生物結(jié)構(gòu)。當與細胞膜結(jié)合后其熒光強度大大增強，這類染料有著很高的淬滅常數(shù)和激發(fā)態(tài)壽命。一旦對細胞染色，這類染料在整個細胞膜上擴散，最佳濃度時可以使整個細胞膜染色。它們的熒光顏色區(qū)分明顯：DiI（橙色熒光），DiO（綠色熒光），DiD（紅色熒光）和 DiR （深紅色熒光）這使得他們可以用來對活細胞進行多色成像和流式分析。DiI和DiO可以分別用標準的 FITC和TRITC的濾光片。DiD可以用 633 nm He–Ne 激光器激發(fā)，有著比DiI更長的激發(fā)波長和發(fā)射波長，在細胞和組織染色中更有價值。 DiR的紅外熒光可以穿透細胞和組織，在活體成像中用來示蹤。 儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。 溶解性：可溶于無水乙醇、DMSO和DMF，其中在DMSO中溶解度大于10mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時可以適當加熱，并用超聲處理以促進溶解。 使用方法 1. DiD，DiO，DiI，DiR和DiS細胞膜染色液制備 （1）配置DMSO或EtOH 儲存液：儲存液用 DMSO或EtOH配置濃度1～5 mM。 注意：未使用的儲存液保存在-20 oC，避免反復(fù)凍融。 （2）工作液制備：用合適的緩沖液（如：無血清培養(yǎng)基，HBSS或PBS）稀釋儲存液，配制濃度為1～5 μM的工作液。 注意：工作液的最終濃度是根據(jù)不同細胞和實驗的經(jīng)驗來配制?？梢詮耐扑]濃度的十倍以上尋找最佳條件。 2. 懸浮細胞染色 （1）懸浮細胞密度為 1 × 106/mL加入到工作液中。 （2）在37 ℃培養(yǎng)細胞 2～20分鐘，不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同。 （3）染色細胞試管在1000～1500轉(zhuǎn)離心5分鐘。 （4）傾倒上清液，再次緩慢加入預(yù)溫37℃的培養(yǎng)液。 （5）重復(fù)（3），（4）步驟兩次以上。 3. 粘壁細胞的染色 （1）使粘壁的細胞在無菌實驗室培養(yǎng)。 （2）從培養(yǎng)基中移走蓋玻片，吸走過量培養(yǎng)液，將蓋玻片放在潮濕的環(huán)境中。 （3）在蓋玻片的一角加入100μL的染料工作液，輕輕晃動使染料均勻覆蓋所有細胞。 （4）在37 ℃培養(yǎng)細胞 2～20分鐘，不同的細胞最佳培養(yǎng)時間不同。 （5）吸干染料工作液，用培養(yǎng)液洗蓋玻片2～3次，每次用預(yù)溫的培養(yǎng)基覆蓋所有細胞，培養(yǎng)5～10分鐘，然后吸干培養(yǎng)基。 4. 顯微鏡檢測 （1）DiD，DiO，DiI，DiR和DiS濾光器的選擇參見表1。 （2）多色染料的同時檢測，濾光器按照以下設(shè)定： a) DiI和DiO＝Omega XF52，Chroma 51004； b) DiI和DiD＝Omega XF92，Chroma 51007； c) DiI，DiO和DiD＝Omega XF93，Chroma 61005 5. 流式細胞儀的檢測 DiD，DiO，DiI，DiR和DiS 染色的細胞可以分別用經(jīng)典的FL1，F(xiàn)L2，F(xiàn)L3和FL4流式細胞儀檢測。 |
| 1、抗體溶解方法 | |
| 2、抗體修復(fù)方式 | |
| 3、常用試劑的配制 | |
| 4、免疫組化操作步驟 | |
| 5、免疫組化問題解答 | |
| 6、Western Blotting 操作步驟 | |
| 7、Western Blotting 問題解答 | |
| 8、關(guān)于肽鏈的設(shè)計 | |
| 9、多肽的溶解與保存 | |
| 10、酶標抗體效價測定程序 | |
