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Calcein, AM (D-9114)  
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產(chǎn)品編號(hào) D-9114
英文名稱 Calcein, AM
中文名稱 鈣黃綠素乙酰甲酯
別    名 Cellstain Calcein-AM; 3',6'-Di(O-acetyl)-4',5'-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester;   細(xì)胞染色劑黃綠素-AM; 3'-O-乙酰胺-2',7'-二(羧乙基)-4或5-羧基熒光素,二乙酰甲酯;
克 隆 號(hào)
CAS 148504-34-1
理論分子量 kDa
檢測(cè)分子量
保存條件 Store at -20℃, protect from light.
產(chǎn)品介紹 Calcein, AM
  CAS#:148504-34-1
  中文名:3'-O-乙酰胺-2',7'-二(羧乙基)-4或5-羧基熒光素,二乙酰甲酯
  英文名:3',6'-Di(O-acetyl)-4',5'-bis[N,N-bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, tetraacetoxymethyl ester
  別名:鈣黃綠素乙酰甲酯
分子式:C46H46N2O23
  分子量:994.86
  性質(zhì):
  1. 外觀:白色或淺黃色晶體
  2. 純度:≥90%(HPLC)
  3. 產(chǎn)品描述:
  Calcein, AM是一種可對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行熒光標(biāo)記的細(xì)胞染色試劑,它穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Calcein,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi),發(fā)出強(qiáng)綠色熒光。與其它同類試劑(如BCECF, AM和CFDA)相比,Calcein, AM的細(xì)胞毒性很低。Calcein的激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為490 nm和515 nm。
  Calcein, AM僅對(duì)活細(xì)胞染色。作為核染色染料的PI不能穿過(guò)活細(xì)胞的細(xì)胞膜,它穿過(guò)死細(xì)胞膜的無(wú)序區(qū)域而到達(dá)細(xì)胞核,并嵌入細(xì)胞的DNA雙螺旋從而產(chǎn)生紅色熒光(激發(fā):535 nm,發(fā)射:617 nm),因此PI僅對(duì)死細(xì)胞染色。由于Calcein和PI-DNA都可被490 nm激發(fā),因此可用熒光顯微鏡同時(shí)觀察活細(xì)胞和死細(xì)胞。用545 nm激發(fā),僅可觀察到死細(xì)胞。根據(jù)以上特點(diǎn),Calcein, AM和PI經(jīng)常被結(jié)合用來(lái)作為活細(xì)胞和死細(xì)胞的雙重染色。
  由于不同細(xì)胞系的最佳染色條件不同,我們建議個(gè)別確定Calcein, AM和PI的合適濃度。
  4. 使用方法
  (1)用DMSO制備1 mM 的Calcein, AM溶液,并用PBS將其稀釋制成1~50 μM的Calcein, AM溶液。注:如果Calcein, AM很難進(jìn)入細(xì)胞,可以使用表面活性劑,如Pluronic F127。
  (2)將1/10細(xì)胞培養(yǎng)基體積的Calcein, AM溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)基中。注:也可以用1/10濃度的Calcein, AM溶液代替培養(yǎng)基。
  (3)在37℃培養(yǎng)細(xì)胞15~30分鐘。
  (4)用PBS或適當(dāng)?shù)木彌_液洗滌細(xì)胞兩次。
  (5)用490 nm激發(fā)波長(zhǎng),515 nm發(fā)射波長(zhǎng)的濾光片的熒光顯微鏡觀察細(xì)胞。

  儲(chǔ)存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
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