產(chǎn)品編號 | C6030 |
英文名稱 | PicaGreen dsDNA Assay Kit *2000 assays* |
中文名稱 | PicaGreen dsDNA 定量檢測試劑盒 |
克 隆 號 | |
CAS | |
理論分子量 | kDa |
檢測分子量 | |
保存條件 | 保存于2-8℃,注意干燥避光。 |
產(chǎn)品介紹 |
1.應(yīng)用說明 在分子生物學(xué)的試驗過程中,PicoGreen? dsDNA 定量試劑盒是熒光檢測雙鏈 DNA 并進行定量 的一種產(chǎn)品,這種方法非常靈敏。常用于分子生物學(xué)技術(shù)中的:cDNA 文庫的構(gòu)建;用于亞克隆的 DNA 片段純化及應(yīng)用,比如進行 DNA 定量、產(chǎn)物擴增和引物的進一步檢測。 疫苗是現(xiàn)代疾病預(yù)防中常用的控制方式。如今許多疫苗是細胞培養(yǎng)疫苗,比如重組乙肝疫苗、狂犬病疫苗等大多數(shù)疫苗都采用細胞培養(yǎng)的方法生產(chǎn)。其中,疫苗的純化是關(guān)鍵問題,我們需要盡可能的去除宿主細胞DNA和宿主蛋白。假若宿主細胞的DNA和蛋白同疫苗一起注入人體將會產(chǎn)生不可預(yù)料的后果。 常規(guī)的DNA含量的檢測方法是在260nm(A260)處測其吸光值。這種方法的主要缺點是核苷酸、單鏈核酸和蛋白質(zhì)對信號的影響很大,并且還會受到核酸制備過程中污染物的干擾,無法區(qū)分DNA和RNA,而且這種方法不靈敏(5μg/mLdsDNA溶液A260=0.1)。 PicoGreen定量檢測方法簡單、方便,被多家生物制品廠所選擇,成為生物制品殘留DNA檢測的標(biāo)準(zhǔn)。 目前該方法已納入2010年版《中國藥典》 原理: PicoGreen與DNA雙鏈結(jié)合后才發(fā)出的熒光,無DNA不發(fā)熒光;所發(fā)熒光與DNA濃度成正比。在2010年《中國藥典》中提出,PicoGreen定量DNA的方法檢出限約0.3ng/ml,DNA含量在1.25-80ng/mL范圍時線性較好(R2>0.99). 優(yōu)點: 1)該方法可以測定來源于任何表達宿主樣品中的雙鏈DNA。 2)可以直接定量PCR擴增產(chǎn)物而無需從反應(yīng)混合物中純化DNA。 3)遠遠超出傳統(tǒng)紫外A260的檢測方法和Hoechst33258的靈敏度。 4)較高濃度的鹽,尿素,乙醇,氯仿,去垢劑,蛋白或瓊脂糖對測定無影 響。 5)在等摩爾濃度 ssDNA 和 RNA 存在的條件下測定 dsDNA,其影響很小。 |